实验目的:本实验旨在利用净信全自动组织研磨仪对骨骼和动物组织(脾组织和肌肉组织)进行高效、均匀的研磨,以提取高质量的DNA、RNA或蛋白,为后续的分子生物学实验提供优质的样本。
实验前的准备:
骨骼:准备新鲜的动物骨骼若干,确保无杂质和多余肌肉附着。
脾组织和肌肉组织:准备新鲜的脾组织和肌肉组织若干,去除脂肪和结缔组织。
研磨仪:净信全自动组织研磨仪(型号:JXFSTPRP-24L)一台,确保设备状态良好,无故障。
耗材:2ml离心管、2mm氧化锆珠子、50ml不锈钢研磨罐、液氮等。
全自动组织研磨仪实拍
实验步骤:
一、脾和肌肉组织的研磨:
组织处理:将脾组织和肌肉组织分别切成小块,放入2ml离心管中。确保组织块大小适中,以便于研磨。
添加珠子:向每个离心管中加入适量的2mm氧化锆珠子。珠子数量根据组织量而定,一般需覆盖组织表面。
研磨操作:将装有组织和珠子的离心管放入净信全自动组织研磨仪中,按照以下参数设置进行研磨:30s重复几次(具体次数根据组织硬度而定),间隔10s,频率65HZ。
检查研磨效果:研磨完成后,取出离心管,观察组织是否研磨均匀。如有需要,可再次进行研磨。
实验效果:
脾和肌肉组织样品研磨前后效果图
二、骨骼的研磨:
骨骼处理:将一整根的骨头用钳子处理成小块,确保每块骨头大小适中,便于研磨。
干燥处理:使用纸巾或吸水纸将骨骼表面的水分吸干,确保研磨过程中无水分干扰。
液氮浸泡:将装有骨骼的不锈钢研磨罐旋上盖子,放入液氮中浸泡几分钟,直至研磨罐内不再冒泡。此步骤有助于降低骨骼硬度,提高研磨效率。
研磨操作:取出研磨罐,立即放入净信全自动组织研磨仪中,按照以下参数设置进行研磨:30s,间隔10s,频率50HZ。注意,由于骨骼硬度较高,研磨过程中可能会产生较大噪音,需做好防护措施。
检查研磨效果:研磨完成后,取出研磨罐,观察骨骼是否研磨均匀。如有需要,可再次进行研磨。
实验效果:
骨骼样品研磨前后效果图
总结:
本次实验利用净信全自动组织研磨仪对骨骼和动物组织进行了高效、均匀的研磨,成功提取了高质量的DNA、RNA或蛋白。实验过程中,我们注意到以下几点:
对于脾和肌肉组织,通过添加适量的氧化锆珠子可以提高研磨效果。珠子数量和组织量需匹配,以确保研磨均匀。
对于骨骼的研磨,液氮的浸泡是关键步骤。通过降低骨骼硬度,可以提高研磨效率并减少噪音。
在处理组织量特别少的情况下,使用小珠子进行研磨可以获得更细的研磨效果。
在进行骨骼研磨前,一定要将骨骼表面的水分吸干,以避免研磨过程中产生冰晶干扰研磨效果。
通过本次实验,我们再次掌握了净信全自动组织研磨仪的使用方法,并成功应用于骨骼和动物组织的研磨。这为后续的分子生物学实验提供了可靠的样本,也为公司药物研发工作提供了有力支持。