实验样品:本次实验样品为水稻叶片,此次选用净信多样品组织研磨进行前处理操作,提取RNA实验。
实验目的:植物核酸提取是一个通过简易化、可操作性的手段获取“pure” DNA和RNA的过程。植物组织越幼嫩新鲜所含的次生代谢产物越少,随着植物组织的逐渐成熟,次生代谢产物的含量会逐渐增多。植物多糖理化性质和核酸相似,在提取过程中容易和核酸一起沉淀,很难去除。如果去除不彻底,多糖抑制许多酶的活性,被多糖污染的核酸无法用于很多分子生物学实验。植物细胞不同于动物细胞,有着厚厚的细胞壁。传统方法破碎费时费力,效果差,且易出现交叉污染。Tissuelyser系列样本制备仪用裂解珠碰撞法(beads-beating)能够处理各种类型植物样本,包括根、茎、叶、种子以及藻类等;可在数秒内彻底破碎植物细胞膜和纤维素细胞壁且无交叉污染、核酸蛋白易降解等问题。
实验设备:
多样品组织研磨仪 Tissuelyser-192L
实验步骤:
1、准备多样品组织研磨仪-192L一台,96深孔板2块,5mm研磨珠。
2、96深孔本以及适配器放入液氮冷冻。
3、将深孔板放入仪器内,旋紧螺帽。
4、按运行键启动,进行样品研磨。
5、研磨结束,关闭电源,将研磨罐从研磨仓取出,用开盖工具打开盖子,取出样品即可。
实验对比图:
样本研磨前后效果图
注意事项:
1、按照样品量来选择研磨珠配比和参数设置,能达到最好的效果,有不清楚的及时问上海净信销售人员。
2、往适配器里放研磨管时注意平面配平,保证适配器压盖在水平线。
本次实验通过使用多样品组织研磨仪Tissuelyser-192L对水稻叶片进行研磨,并成功提取了RNA。实验过程中,我们深刻体会到了研磨仪在植物组织研磨和RNA提取方面的显著优势。裂解珠碰撞法不仅能够在短时间内彻底破碎植物细胞壁,还避免了传统方法中的费时费力、效果差以及交叉污染等问题。通过本次实验,我们验证了该研磨仪在处理植物样本、尤其是水稻叶片方面的有效性,并成功获得了高质量的RNA样本。这为后续的分子生物学实验提供了有力的支持。同时,我们也意识到在实验中合理设置研磨珠配比和参数的重要性,以及实验操作中的注意事项,这将有助于我们更好地进行类似实验,提高实验结果的准确性和可靠性。