单细胞技术已经广泛应用于肿瘤,免疫,发育生物学,神经科学,细胞治疗,药物研发及动植物研究中。但并不是所有的组织都适用于单细胞RNA测序,现阶段单细胞RNA测序研究的一个极大的挑战仍是如何获得高质量的单细胞悬浮液。科研者单细胞悬液制备仪具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。带加热功能,对样品的消化处理过程始终处在恒温状态,细胞得率高达90%,方便了对真核生物进行单细胞核RNA测序。
此次的实验样品为肝组织,肝是人体最大的腺,可分泌胆汁,合成多种蛋白质和脂类物质。肝细胞能进行物质的合成、分解、转化、贮存。作为消化器官,肝脏参与糖、脂类、蛋白质三大基本物质的代谢。
实验设备:单细胞悬液制备仪 JX-CKSM-4WK
实验步骤:
1、打开仪器电源开关,将仪器界面中的模块加热和热板加热点开,将其两者先预热恒温到37℃左右。
2、将穿刺成长条的样本剪一部分下来直接放入净信2ml研磨管中。
3、加入净信消化酶,旋上盖子,上下微微晃动研磨管将其组织和消化酶均匀混合。
4、将混合好的研磨管放入加热模块中,将其研磨管中的样品和试剂恒温至37℃后,再将研磨管放入热板中,盖上盖子。
5、启动Program 2(25min)
6、待仪器程序时间到之后出现滴滴的提示音,则打开仪器盖子,取出样品管
7、将样品管中的液体和剩下的组织一起倒入过滤管中,然后再加入终止液(避免消化酶将液体中的单细胞也消化完了),得到的液体,即单细胞悬液。
实验效果:
样品制备前后效果对比图
以上就是此次单细胞悬液制备仪对肝组织的研磨全过程,可供大家进行参考,需要注意是消化酶和终止液均需要在冷冻环境下保存,消化酶解冻时需在常温条件下解冻,不可以放入水浴或者其他加热仪器中解冻,温度升高对酶的活性会有很大的影响。