冷冻研磨仪｜疾控病媒生物研磨-净信

2019年12月以来，新型冠状肺炎疫情仍在肆虐。国家对新型冠状肺炎以及相关的病媒生物威胁公共安全加大投入力度，各地疾控中心也开始病媒生物研究筛选预防工作。在我国法定报告的传染病中有许多属于病媒生物性传染病，如鼠疫、流行性出血热、钩端螺旋体病、疟疾、登革热、地方性斑疹伤寒、丝虫病等；而一些消化道传染病则通过病媒生物的机械性传播在人群中扩散，如痢疾、伤寒等。

病媒生物性传染病是人类共同面临的严峻挑战之一。通过对病媒生物的有效控制，可以减少它们对人群的骚扰和经济损失，更可以预防和控制病媒生物性传染病的发生和传播。加强病媒生物疾病预防控制已成为一个迫切的任务。安徽省疾病预防控制中心毒理科做病媒生物实验时，就使用上海净信冷冻研磨仪。

实验背景：鼠类不仅传播鼠疫、流行性出血热、钩端螺旋体病、斑疹伤寒等多种疾病，严重危害人类健康;而 且通过啮咬、盗食、污染等方式给工业、农牧业生产等造成直接或间接的经济损失。

一、材料和方法：

样品来源于居民区及收治医院周 围 环 境 采 集 目 标 病 媒 生 物。160份鼠肺样品来自本地，15份蜚蠊体表擦拭子来自安徽等地。所有样品均冻存于-80摄氏度待检。

二、仪器及试剂：

1、上海净信冷冻研磨仪

2、荧光定量PCR分析仪

3、高效病毒浓缩试剂盒

4、巢式RT-PCR所采用的引物,一步法RT-PCR试剂盒

5、RNA提取试剂盒

三、 实验方法

1、样品RNA的提取 别取待检鼠肺组织于全自动样品冷冻研磨仪充分再加入异硫酸氰胍溶液，充分溶解后于-20℃保存，备蜚蠊体表擦拭子中加入无菌生理盐水少许于4℃中过夜，挤压后取出棉拭子，将剩余液体离心5min，其上清液则用高效病毒浓缩试剂盒进行浓缩，浓缩所得的晶体中再加入异硫酸氰胍溶液，充分溶解后于-20℃保存备用，按照试剂盒的说明 从样品的异硫酸氰胍溶液中提取提取所得的RNA保存备用。

样品研磨前后

实验步骤：

1、准备全自动样品冷冻研磨仪。

2、金属适配器，以及钢珠适配器。

3、将老鼠组织剪碎，放入研磨管，加入钢珠。

4、将适配器装入净信研磨仪中，开启低温功能保持温度。

5、设定参数，启动仪器至研磨程序结束，可得到如图所示样品。

仪器介绍：

上海净信JXFSTPRP-CLN冷冻研磨仪是一种快速、高效、制冷的研磨系统。它能在非常短的时间内将土壤、植物和动物的组织/器官、细菌、酵母、真菌、孢子、古生物标本等样品完成研磨、粉碎、混合机细胞破壁。广泛应用于生命科学、医药、生化、环境、地质、农业、林业、质检、材料等领域。