摘要: 多样品组织研磨仪对水稻研磨叶片研磨实验主要目的是满足分子标记辅助育种中基因型鉴定 、基因克隆 、测序的需要,本研究借用棉签等具吸附功能的材料代替移液器,依次直接在2种DNA提取液中操作,建立了一种简单 、快速 、环保的水稻叶片DNA提取方法.结果表明,提取溶液通过PCR扩增,满足基因扩增对模板的要求;
同时,对其进行了灵敏度测试,稀释107倍仍然能够扩增出目标片段;最后通过PCR、克隆载体连接等分子生物学手段,验证此方法也满足测序的需要.本方法能够在90s内完成植物叶片DNA的提取,解决了目前植物基因组DNA提取方法需要离心机等昂贵特殊设备 、提取步骤繁锁 、提取过程中刺激味大 、提取时间长等问题,有利于大规模开展分子标记辅助育种中材料基因型的鉴定,具有简单 、快速 、廉价 、环保等优点.
实验目的:拟测试全自动样品快速研磨仪对水稻叶片研磨效果
1.测试对象:上海净信多样品组织研磨仪,型号为JXFSTPRP-24L
2.工作原理:样品(水稻叶片)放入离心管中,放入研磨球,通过研磨仪的高速上下振荡带动研磨珠进行粉碎样品。
3.实验器材:上海净信组织研磨仪主机,水稻叶片,不锈钢研磨珠两颗,提取试剂
实验步骤:
一、首先根据研磨要求将组织研磨仪的研磨频率及研磨时间进行设置
二、把水稻叶片剪成小段放入净信离心管中,加入氧化锆珠和相应提取试剂
三、最后把离心管放入机器适配器中,启动设备进行研磨,完成样品粉碎
实验效果:
研磨前后效果图
注:多样品组织研磨仪针对叶片的研磨时,尽可能加提取试剂,让研磨过程中有液体的情况下使研磨效果会更加充分。